双端与单端测序

什么是双端测序?

用户可使用双端测序方法对片段的两端进行测序,并生成高质量、可比对的测序数据。双端测序有助于检测基因组重排、重复序列元件、基因融合及新转录本。

除了在相同的时间内、开展相同文库制备工作的情况下产生两倍数量的read以外,作为read对进行比对的序列可以实现更准确的read比对,而且还能检测出单端测序数据无法检出的插入缺失(indel)变异。1所有Illumina新一代测序(NGS)系统都可用于双端测序。

双端测序

双端测序的优势

  • 简单的双端测序文库:简单的工作流程能够生成特定尺寸范围的插入片段
  • 高效的样本利用:需要的DNA量与单端基因组DNA或cDNA测序相同
  • 广泛的应用范围:无需DNA甲基化或限制性内切酶消化;可用于亚硫酸氢盐测序
  • 简单的数据分析: 利用小插入片段文库进行高质量测序组装。对标准单端read文库制备过程进行简单的修改,便于在一次双端read期间读取每个簇的正向和反向模板链。两种read都包含长片段的位置信息,可提供高精度的read比对。
Illumina测序简介

本概述介绍了主要的测序技术进展、重要方法、Illumina测序化学过程的基础等内容。

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双端DNA测序

双端DNA测序read在含有重复序列的DNA区域上提供了高质量的匹配,并且通过填充共有序列中的缺口产生长重叠群以用于从头测序。双端DNA测序还能检测插入、缺失和倒位等常见DNA重排。

DNA测序方法

DNA测序可通过多种方法应用于小的目标区域或全基因组测序。

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参考文献
  1. Nakazato T, Ohta T, Bono H. Experimental design-based functional mining and characterization of high-throughput sequencing data in the sequence read archive.PLoS One. 2013;8(10):e77910.
  2. Wang Z, Gerstein M, Snyder M. RNA-Seq: a revolutionary tool for transcriptomics.Nat Rev Genet.2009;10:57-63.