胞嘧啶甲基化可显著改变基因的时空表达和染色质重塑。使用新一代测序(NGS),全基因组分析和靶向方法都可以在单核苷酸水平上对甲基化模式进行深入研究。
甲基化测序的优势:
许多方法利用了NGS的高质量和灵敏度来进行甲基化分析。大多数方法依赖DNA的亚硫酸氢盐转化来检测未甲基化的胞嘧啶。在文库制备过程中,亚硫酸氢盐的转化会将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶。在测序数据中,转化后的碱基会被识别为(PCR后)胸腺嘧啶,并使用read读数来确定甲基化胞嘧啶的百分比。
亚硫酸氢盐转化测序可以用扩增子methyl-seq、靶向富集或全基因组亚硫酸氢盐测序等靶向方法进行。此外,OxBS和TAB-Seq等替代化学技术也可以与NGS一起用于羟甲基化(5-hMc)的鉴定以及甲基化(5-mc)分析。
请参阅DNA甲基化分析领域指南,深入了解甲基化分析方法。
目前世界上90%以上的测序数据是利用Illumina NGS技术产生的。*
Illumina提供了完整的甲基化测序工作流程,从文库制备到数据分析。
异常甲基化、转录因子结合改变和其他表观遗传学变化的研究可以提供对重要致癌通路的了解。深入了解癌症表观遗传学研究。
全基因组甲基化测序可以帮助研究人员了解神经学、免疫学和其他复杂疾病中起作用的功能机制。深入了解复杂疾病研究。
The DNA methylation landscape of Chinese hamster ovary (CHO) DP-12 cells.
J Biotechnol 199 38-46 2015
Single-cell DNA methylome sequencing and bioinformatic inference of epigenomic cell-state dynamics.
Cell Rep 10 1386-97 2015
Transient acquisition of pluripotency during somatic cell transdifferentiation with iPSC reprogramming factors.
Nat Biotechnol 33 769-74 2015
*根据Illumina公司2015年存档数据计算